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无核糖核酸酶

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价格 1.00 元/毫克
  • 商品分类: 叶黄素
  • 供货总量: 9999 毫克
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  • 发布日期: 2018-11-02
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上海远慕生物科技有限公司

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  • 营业执照:已审核
  • 主营类目:叶黄素
  • 所在地区:上海市上海城区浦东新区浦东川沙经济园区

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产品详情

只能水解RNA磷酸二酯键的酶称核糖核酸酶(ribonuclease,RNase)。不同的RNase其专一性不同,例如牛胰核糖核酸酶(RNase I),它的作用位点是嘧啶核苷3’一磷酸与其他核苷酸之间的连接键,而核糖核酸酶T1(RNase T1)的作用位点是3L鸟苷酸与其他相邻核酸之间的5’一OH间的连键。

核糖核酸酶A(RNase A)来源于牛胰脏,是一种内切核糖核酸酶,可特异攻击RaNA上嘧啶残基的3’端,切割胞嘧啶或尿嘧啶与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键,反应终产物是3’嘧啶核苷酸和末端带3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。无辅助凶子及二价阳离子存在时,核糖核酸酶A的作用可以被胎盘RNA酶抑制剂(RNasin)或氧钒一核糖核苷复合物(vanadyl—ribonuclosidecomplex,VRC)所抑制。RNase A的反应条件极广,且极难失活。在低盐浓度(0~100 mmol/l NaCl)下,RNase A切割单链和双链RNA、DNA:RNA杂交体中的RNA;当NaCl浓度为300 mmol/l。或更高时,RNase A就特异性切割单链RNA。去除反应液中的RNase A,通常需要蛋白酶K处理、酚反复抽提和乙醇沉淀。在分子克隆中,核糖核酸酶A的主要用途为:
①从DNA:RNA杂交体中去除未杂交的RNA区。
②确定RNA或DNA中的单碱基突变的位置。在RNA:DNA或RNA:RNA杂交体中,若存在单碱基错配,可用RNase A识别并切割。通过凝胶电泳分析切割产物的大小,即可确定错配的位嚣。
③RNA检测。RNA酶保护分析法(RNase protection assay)是近年来发展起来的一种检测RNA的杂交技术。其基本原理是利用单链RNA探针,与待测的RNA样品进行杂交形成RNA:RNA双链分子,由于RNA酶可专一性地降解未杂交的单链RNA,而双链受到保护不被降解,经凝胶电泳可以确定目的RNA的长度。该方法灵敏度较Northern杂交法更高,并可进行较为准确的定量。选择适当的探针,还可进行基因转录起始位点分析及内含子(也称内元)剪切位点分析等研究。此法的灵敏度比核酸酶S1保护分析法高数倍。
④降解DNA制备物中的RNA分子。须使用无DNasd的RNase(DNase I free RNase),市售的一般RNase A常含有DNase,可在100 retool/I Tris—CI(pH 7.5)和15 mmol/l。NaCI溶液中100℃加热15 min,以去除之。



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